5-氮杂-2脱氧胞苷去除p14启动子甲基化对人肺癌细胞生物学功能的影响

摘要

目的 探讨5-氮杂-2脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,DAC)去除p14ARF基因启动子异常甲基化状态对人肺癌细胞生物学功能的影响.方法 利用巢式甲基化特异性PCR(NMSP)检测spca1细胞系及beas2b细胞系p14ARF启动子区域甲基化情况,根据细胞类型及是否进行DAC处理将细胞分为4组:spca1 DAC处理组 、spca1对照组、beas2b DAC处理组、beas2b对照组,每组设置6个复孔,Western blot检测各组p14ARF蛋白表达情况,流式细胞术进行细胞凋亡检测.结果 NMSP检测到spca1细胞p14启动子区域存在异常的甲基化状态,使用DAC去除p14启动子区异常甲基化spca1细胞中ARF蛋白的表达恢复,细胞凋亡率spca1 DAC处理组(20.69±1.03)％显著高于spca1对照组(10.63±0.82)％(t=13.17,P0.05).结论 DAC去除p14ARF启动子区域异常甲基化后ARF蛋白表达恢复,诱导spca1细胞凋亡,对肺癌发生起到抑制作用.