基于无机载体的先交联后吸附固定化脂肪酶的方法

摘要

目的:使用双功能环氧交联剂新戊二醇二缩水甘油醚和硅藻土载体固定化海洋脂肪酶,并探究固定化酶的酶学性质.方法:采用先交联后吸附的方法固定化海洋脂肪酶,交联和吸附分别进行单因素与正交实验结合的实验方案,并测定固定化酶的酶活力.结果:确定最佳交联条件:pH5.5,温度35℃,交联剂质量分数0.5%,交联时间2h;最佳吸附条件:温度40℃,载体质量1.5g,吸附时间5h.在此工艺条件下,所制备的固定化脂肪酶活力为1.89μkat,酶活力回收率72.89%.与游离的脂肪酶相比,所制备的固定化脂肪酶具有更好的温度、pH、储存及操作稳定性.结论:基于环氧交联剂新戊二醇二缩水甘油醚和硅藻土载体,进行先交联后吸附固定化海洋脂肪酶的技术具有良好的工业应用前景.