菊黄东方鲀卵黄蛋白原肽段vWD的真核重组表达及功能研究

摘要

河鲀的卵黄蛋白原可能参与河豚毒素(TTX)的体内转运过程。为了探讨该机理,建立了毕赤酵母真核表达系统,成功地表达了菊黄东方鲀(Takifugu flavidus)卵黄蛋白原的vWD结构域肽段(rTF_(v)WD),并采用Biacore-表面等离子体共振(SPR)系统检测了rTF_(v)WD与TTX的亲和力,以及腹腔注射小鼠验证rTF_vWD对TTX毒力的中和作用。结果表明:rTF_(v)WD与TTX的平衡解离常数(KD)为3.1 mmol/L;将TTX与rTF_vWD共孵后肌肉注射小鼠,2 h内小鼠的死亡率显著下降,表明TTX与rTF_(v)WD结合后,TTX的毒性降低了。