rhHSP110毕赤酵母工程菌的大规模发酵及产物纯化

摘要

目的:探讨重组人HSP110 (rhHSP110)毕赤酵母工程菌在80L发酵罐中大规模发酵的工艺及发酵产物rhHSP110的纯化方法.方法:在摇瓶中制备rhHSP110工程菌种子2L,将种子接种到80L发酵罐中,采用补料分批培养方式对工程菌进行高密度发酵.控制和优化各种发酵条件,经历72h后结束发酵.将发酵液离心,经阳离子交换层析对上清中的表达产物进行纯化.结果:控制发酵温度为30℃, pH值为4.2,溶氧值为20%以上,在酵母细胞湿重达到200g·L-1时开始甲醇诱导表达,72h后结束发酵.发酵上清通过阳离子交换层析纯化后获得纯度为80%的rhHSP110,产量为500mg·L-1.结论:rhHSP110酵母工程菌在80L发酵罐高密度发酵成功,为rhHSP110的产业化生产及临床研究了莫定基础.