血管内皮钙黏蛋白在非小细胞肺癌血管生成中的作用

摘要

目的:探讨血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)在非小细胞肺癌(NSCLC)血管生成中的作用,为NSCLC的抗血管生成治疗提供实验依据.方法:将人肺癌A549细胞分为空白对照组、干扰组和阴性对照组,VE-cadherin-siRNA瞬时转染A549细胞,实时定量PCR和Western blotting法检测VE-cadherin在各组细胞中表达水平；新型四唑氮盐(MTS)比色法检测A549细胞吸光度(A190)值的变化；流式细胞术检测细胞周期和凋亡率；ELISA法分析A549细胞瞬时转染上清中VE-cadherin的表达水平；并分析上清液作用后人脐静脉内皮细胞(HUVECs) A490值、各周期(G0/G1、G2/M和S)细胞比率、凋亡率和Matrigel小管形成数的改变.结果:干扰组VE-cadherin mRNA的表达水平(0.299±0.039)明显低于空白对照组(1.137±0.082)和阴性对照组(1.001±0.076)(P＜0.05);干扰组VE-cadherin蛋白的表达水平(0.297±0.045)明显低于空白对照组(0.833±0.119)和阴性对照组(0.794±0.095)(P＜0.05);各组A549细胞A490值、各周期细胞比率和凋亡率比较差异无统计学意义；干扰组上清液中VE-cadherin的表达水平[(2.89±0.07) μg·L-1]明显低于空白对照组[(11.43±0.09)μg·L-1]和阴性对照组[(11.15±0.04)μg·L-1](P＜0.05).干扰组与阴性对照组上清液作用后G0/G1、G2/M和S期HUVECs所占百分比比较差异无统计学意义(P＞0.05)；干扰组上清液明显抑制了HUVECs的增殖,作用24、48和72h细胞增殖抑制率分别为29.2％、33.8％和30.1％；作用48h干扰组HUVECs的凋亡率为27.12％±5.22％,显著高于阴性对照组(13.43％±3.50％) (P＜0.05).干扰组HUVECs小管形成数为1.53±0.31,显著低于阴性对照组(14.53±1.51) (P＜0.05).结论:VE-cadherin可能通过促进血管生成参与NSCLC的发生发展,有望成为NSCLC抗血管生成治疗的新靶点.