LMW-GS16基因表达载体的构建

摘要

采用PCR方法对来自大麦的LMW-GS16基因进行修饰,在基因5′及3′端分别加入构建表达载体所需的BamHI和SacI限制酶切位点,并将其连接在相应酶切的质粒pBI121上,构建成LMW-GS植物表达载体pBI121-16.重组质粒转化到E.coli DH5α和农杆菌LBA4404中,通过Kanamycin筛选阳性克隆,用PCR方法进行鉴定.对照组转化率为零,转化组阳性克隆特异地扩增出900bp片段,与目标基因DNA大小一致,转化率为1.0×106/μgDNA.