流感嗜血杆菌表面天冬氨酸酶和其突变体蛋白的表达纯化及酶活性测定

摘要

目的表达纯化不可分型流感嗜血杆菌表面天冬氨酸酶(r ASP)和其敲除羧基末端赖氨酸的重组蛋白(r ASPΔK)。方法克隆了不可分型流感嗜血杆菌ATCC49247的ASP基因和ASPΔK基因,与载体连接后,转入大肠杆菌表达蛋白,并用Co2+亲和柱层析纯化蛋白;采用酶促反应测定纯化蛋白的酶活性。结果两种基因的克隆和表达质粒构建成功,目的蛋白表达量大且具有较高的酶活性。结论成功表达纯化了r ASP和r ASPΔK蛋白。