牛源纤维素降解菌的分离筛选与鉴定

摘要

为了提高牛粪中的纤维素降解效率,筛选牛粪发酵菌剂的优良菌种,采用连续稀释平板法,以羧甲基纤维素纳(CMC-Na)为碳源,从新鲜牛粪和腐熟牛粪中对纤维素降解菌株进行初步分离.对所得菌株进行纤维素水解圈测定,并进一步采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定纤维素酶活,再结合菌落形态、生化反应特性和16S rDNA序列分析进行菌种鉴定.研究结果表明:从牛粪样品中初步分离得到了56株纤维素降解菌,进一步水解圈测定筛选出13株菌,其中菌株NA10的水解圈最大,水解圈直径与菌落直径比值(H/C)为5.35,该菌纤维素酶活(CMC)和滤纸酶活(FPA)分别为55.13 U/mL和35.47 U/mL.观察NA10菌落呈乳白色圆盘状,表面光滑不透明.显微镜下,可见NA10经革兰氏染色呈阳性,为短杆状、链状排列,中生芽孢.生化反应显示NA10符合芽孢杆菌属安全芽孢杆菌的特征.经16S rDNA基因序列分析鉴定,该菌株为芽孢杆菌属的安全芽孢杆菌(Bacillus safensis),将其命名为Bacillus safensis NA10.本文分离得到一株具有降解纤维素潜力的菌株,可作为制备发酵菌剂的优势菌种之一.