一种复方中草药免疫增强剂对牙鲆免疫力及抗病力的影响

摘要

为研究中草药复方制剂对牙鲆Paralichthys olivaceus免疫力及抗病力的影响,实验基于中草药药物功效与配伍原则,研制出一种复方中草药免疫增强剂(YLK),配方包含黄芪、茯苓、党参、蒲公英、鱼腥草、白花蛇舌草、金银花、玉竹、甘草、五味子等;将复方中草药分别以1％(W:W)和3％(W:W)的添加量拌入基础配合饲料中,连续投喂牙鲆30 d,然后用迟钝爱德华氏菌Edwardsiella tarda攻毒,分别于攻毒后24 h和72 h取鱼血清进行免疫相关酶活性测定,同时在攻毒后6,12,24,48,72 h取鱼脾脏进行免疫相关基因表达水平的检测,并观察记录鱼体的累计死亡情况.结果表明,在迟钝爱德华氏菌感染后24 h和72 h,3％中草药添加组的牙鲆血清中碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)、酸性磷酸酶(Acid Phosphatase,ACP)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)以及溶菌酶(Lysozyme,LSZ)活性水平均显著高于仅投喂基础饲料的对照组;1％中草药添加组除ALP活性以外,其他3种酶活水平也显著高于对照组(P<0.05),2组不同中草药添加组鱼体血清酶活整体上差异不显著性;荧光定量PCR检测结果显示,各投喂组牙鲆脾脏组织中白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、TCRα受体及C型溶菌酶基因表达量均出现不同程度的上调,而2个中草药投喂组牙鲆在感染后多个时间点的基因表达水平均高于单独投喂饲料组的牙鲆(P<0.05);添加3％中草药和1％中草药对牙鲆抗迟钝爱德华氏菌感染的相对保护率分别为34.2％和26.3％.研制的复方中草药制剂具有明显的免疫增强效果,能显著提高牙鲆抗迟钝爱德华氏菌感染能力,研究结果将为水产养殖中草药防病技术研究提供重要参考.