氧化应激对人脐静脉内皮细胞甲基化和羟甲基化的影响

摘要

目的:研究氧化应激对人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)甲基化和羟甲基化的影响.方法:用1 mmol·L-1双氧水(H2O2)处理HUVECs诱导细胞内氧化应激,同时以等体积的培养基做为对照.收集处理0 h、1 h、4 h和8 h后的细胞,通过多重反应监测质谱定量(Multiple response monitoring mass spectrometry quantification,MRM-MS)方法检测各组细胞中甲基化率和羟甲基化率的变化.结果:与对照组细胞相比,H2O2处理1 h、4 h和8 h组细胞中DNA甲基化率均显著增加(P<0.05),并随处理时间增加,细胞中DNA甲基化率增加越显著,呈时间依赖性;而1 h、4 h和8 h组细胞中DNA羟甲基化率均显著降低(P<0.05);其中处理1 h和4 h后两组之间细胞中DNA羟甲基化率变化不明显,但8 h后,细胞中DNA羟甲基化率显著降低(P<0.05);1 h、4 h和8 h组细胞中甲基化率和羟甲基化率总和均显著增加(P<0.05),并且随处理时间增加,细胞中DNA甲基化率和羟甲基化率总和增加越显著,呈时间依赖性.结论:氧化应激增加HUVECs中DNA甲基化率,降低DNA羟甲基化率.