基于细胞计数试剂盒8的药物淋巴细胞刺激试验在急性药物性肝损伤诊断中的应用

摘要

目的 建立一种基于细胞计数试剂盒8(CCK-8)法的药物淋巴细胞刺激试验(DLST)并应用于急性药物性肝损伤(DILI)的诊断.方法 筛选2011年1月-2014年12月北京佑安医院收治的急性DILI患者,收集导致肝损伤的可疑药物,分离外周血单个核细胞(PBMC),经体外培养后,与可疑药物共孵育,采用CCK-8法检测淋巴细胞的增殖程度.每次实验设阳性对照组,以植物血凝素进行刺激;同时以健康人的PBMC暴露于相同药物,同步检测作为阴性对照.将DLST结果引入RUCAM评分系统,评估对急性DILI诊断敏感性的影响.计数资料组间比较采用x2检验.结果 预实验确定了CCK-8法DLST的实验条件.共纳入61例急性DILI患者,其中52例75种药物完成了基于CCK-8法的DLST检测,48例70种药物结果可靠,共19例22种药物DLST阳性,患者和药物的阳性率分别为39.6％和31.4％,特异性为93.8％,38.2％ (13/34)的中药和25.0％ (9/36)的西药的DLST结果为阳性,刺激指数中位数为2.29(1.81～14.20).将DLST结果引入RUCAM评分系统,可将评估结果为“极可能”和“很可能”的药物由74.7％提高至92.0％ (x2 =8.112,P=0.004).结论 利用CCK-8法可进行DLST,将DLST结果引入RUCAM评分系统可显著提高对DILI诊断的敏感性.与经典DLST相比,这种基于CCK-8法的DLST实验室要求低,操作简便、快捷,且花费更低,可在临床进一步使用验证.