紫草醌通过调节HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路影响骨微环境和脊柱肿瘤细胞的异质性的机制

摘要

目的 评价紫草醌在体内对脊柱肿瘤的潜在治疗作用及其作用机制.方法 成功建立脊椎肿瘤模型后,将大鼠分为假手术组(正常大鼠,仅进行手术操作+等量0.9％氯化钠溶液灌胃)、模型组(脊椎肿瘤模型大鼠+等量0.9％氯化钠溶液灌胃)和紫草醌组(脊椎肿瘤模型大鼠+100 mg/kg的紫草醌溶液灌胃),每组10只,均连续灌胃2周.采用苏木精-伊红(HE)染色对大鼠脊椎瘤形态进行观察,利用转染法、TUNEL法对大鼠脊椎瘤的凋亡情况进行测定,通过实时PCR和免疫印迹(Western blotting)法检测紫草醌对大鼠脊柱肿瘤的细胞因子迁移率族蛋白B1(HMGB1)、TOLL样受体4(TLR4)和核因子κB(NF-κB)mRNA及相关蛋白的表达量.结果 治疗后3、7和14 d紫草醌组BBB得分随时间而显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后3、7和14 d,与假手术组相比,模型组和紫草醌组BBB得分显著降低,紫草醌组则较模型组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05).HE染色结果表明,与模型组相比,紫草醌骨髓组织结构的疏松、中性粒细胞浸润等组织学损伤明显减轻.与假手术组相比,模型组和紫草醌组HMGB1、TLR4和NF-κB mRNA相对表达量和蛋白表达水平显著增加,紫草醌组则较模型组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).紫草醌组肿瘤细胞凋亡率和Caspase-3的表达量与模型组相比均显著增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 紫草醌通过调节HMGB1-TLR4-NF-κB信号通路影响骨微环境和脊柱肿瘤细胞的异质性,从而可能对脊柱肿瘤具有一定的缓解作用.