氧化应激在心脏骤停引起的小鼠自噬体清除损伤中的作用

摘要

cqvip:目的探讨氧化应激在心脏骤(CA)停引起的小鼠自噬体清除损伤中的作用。方法将30只昆明小鼠随机均分为3组:假手术组、CA组和MnTMPyP组,后两组采用改良的窒息法建立心脏骤停-自主循环恢复(CA-ROSC)小鼠模型。假手术组不进行CA,其余同CA组。MnTMPyP组在建模之前给予一次性腹腔注射6 mg/kg的起氧化物歧化酶(SOD)模拟物MnTMPyP[作为活性氧(ROS)的清除剂]。CA-ROSC后6 h,Western Blot检测各组小鼠大脑皮质自噬体及溶酶体相关指标,试剂盒法检测氧化应激相关指标[ROS、超氧化歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)],TUNEL染色检测细胞死亡情况。结果CA组自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、Beclin-1、泛素(ubiquitin)和SQSTM1/p62表达均显著高于假手术组(P<0.05),MnTMPyP组显著低于CA组(P<0.05)。CA组ROS含量及TUNEL阳性细胞数均显著高于假手术组(P<0.05),MnTMPyP组显著低于CA组(P<0.05)。CA组SOD、GSH-Px、溶酶体关联膜蛋白2(LAMP2)和组织蛋白酶D(Cathepsin D)水平均显著低于假手术组(P<0.05),MnTMPyP组显著高于CA组(P<0.05)。结论氧化应激抑制可缓解CA-ROSC导致的自噬体清除受损及溶酶体功能障碍,抑制神经元死亡。