人甲状旁腺激素调节骨保护素及其配体基因表达的PKA、PKC信号传导通路研究

摘要

目的 探讨PTH调节成骨细胞OPG/RANKL mRNA表达的信号传导通路.方法院采用原代培养的胎鼠颅盖骨成骨细胞,在细胞培养5 d和6 d后,分别加入抑制PKC和PKA传导通路的Calphostin-C 500 nmol/L 24 h和H-89 30 μmol/L 4 h.在细胞培养5 d后,加入刺激PKC传导通路的PMA10-7mol/L 24 h后,分别加入和不加入hPTH(1-34)100 ng/ml,继续培养2 h和6 h分别收集细胞,采用RT-PCR方法半定量检测OPG和RANKL基因的表达变化.结果 PKA通路抑制剂H-89 30 μmol/L能显著改变100 ng/ml hPTH(1-34)导致的OPG和RANKL基因的表达趋势,表现为上调OPG基因和下调RANKL基因(35%和59%).而PKC通路激动剂和抑制剂对100 ng/ml hPTH(1-34)导致的OPG和RANKL基因的表达趋势无影响.结论 hPTH持续刺激上调RANKL基因,下调OPG基因的表达,主要是通过PKA通路介导,在此过程中,PKC通路无作用.