木瓜超氧化物歧化酶粗酶提取工艺初探

摘要

[目的]筛选木瓜超氧化物歧化酶(SOD)粗酶最佳提取工艺.[方法]以重庆綦江皱皮木瓜为原料,以溶解SOD,去除杂蛋白,沉淀SOD为基本工艺程序,对SOD的4种提取工艺进行比较研究.同时对4种工艺提取的SOD单位蛋白、活性、比活的检测结果进行比较.[结果]磷酸缓冲液的用量对提取效果有直接影响,缓冲液与木瓜之比为3:1,测得其比活最高,为54.55 U/mg.粗酶液加2.5倍体积的氯仿-乙醇混合液去除杂蛋白效果比较明显.粗酶液添加(NH4)2SO4到90%饱和度沉淀SOD效果较好,比活较提取液上升44.52 U/mg.[结论]木瓜SOD粗酶最佳提取工艺条件:温度为25～30℃,pH值为7.8,0.05mol/L磷酸缓冲液与木瓜比例为3:1,用2.5倍体积的氯仿-乙醇混合液去杂蛋白,添加55%(NH4)2SO4至90%饱和度沉淀SOD.