不同保存条件下云杉八齿小蠹总DNA提取方法的比较分析

摘要

[目的]探讨云杉八齿小蠹总DNA的提取方法.[方法]将野外采集的云杉八齿小蠹分别保存在95%的酒精浸泡、自然风干和-40℃条件下,采用改良CTAB法、Kac法、盐析法和SDS法对不同保存条件下样品材料总DNA进行提取.[结果]结果表明,4种方法均可从95%酒精浸泡标本和-40℃冻存样品中提取出高质量的总DNA.相比之下改良CTAB法最为简单、高效、经济.以COI的通用引物对所提取的总DNA进行扩增检测,结果表明,采用改良的CTAB法可以从95%的酒精浸泡样品和-40℃冰存样品DNA中扩增出清晰的单一条带,片段大小700 bp,经与已知昆虫的COI片段分子量对比,可以初步断定其为CO I片段.[结论]该研究结果为今后小蠹类的分子系统学研究奠定基础.