hpRNA的制备新方法及其在RNAi载体中的应用

摘要

[目的]验证制备新方法所获得的稳定hpRNA是否可用于RNAi载体的构建并达到基因表达干扰的效果.[方法]利用制备新方法(2μL DNA与8μL H2O混匀,95℃ 5 min,37 ℃ 15 min)制备hpRNA,后采用REGS方法构建ZmMDAR RNAi载体,通过Grx1-roGFP2和荧光实时定量PCR检测基因表达干扰的效果.[结果]利用制备新方法制备50 nt hpRNA.ZmMDAR基因的表达量变化和Grx1-roGFP2探针的荧光比值变化表明hpRNA介导的干扰载体引起了原生质体氧化还原状态的变化.[结论]通过制备新方法所制备的hpRNA为RNAi载体所介导的干扰作用奠定基础.