牛乳铁蛋白ELISA检测方法的研究

摘要

本文建立了一种ELISA检测牛乳铁蛋白的方法.主要摸索了ELISA的工作条件,采用方阵滴定法确定抗原包被浓度和一抗稀释浓度,进而确定了二抗工作浓度,通过重复性试验和交叉性试验验证了该法的重现性和特异性.结果表明一抗工作浓度为1:200 000稀释,二抗工作浓度为1:100 000稀释,在此条件下检测牛乳铁蛋白的限度为1.56～100 ng/mL,在此范围内,牛乳铁蛋白浓度与OD值之间呈指教相关,其回归方程为y=1.2770×(1.014 5-e-0.0338x)(R2=0.999 2).本研究为研制牛乳铁蛋白检测试剂盒奠定了基础.