沙门菌PrgH蛋白的生物信息学分析及其单克隆抗体制备

摘要

对沙门菌三型分泌系统(TypeⅢsecretion systems,T3SSs)注射装置的内环组成蛋白PrgH理化和结构进行生物信息学分析并制备PrgH的多克隆抗体和单克隆抗体.结果表明PrgH是一种单次跨膜,亲水性的不稳定蛋白,基因鉴定及进化树分析显示prgH在沙门菌中广泛存在且高度保守.以原核表达的PrgH作为免疫原制备的兔多克隆抗体,效价高达1:1024000,同时制备两株单克隆抗体4 E2,4 G7,效价分别为1:1024000,1:2048000.分析了PrgH的理化、结构特性,制得针对PrgH的亲和性抗体,为PrgH的生物学功能和T3 SSs致病机制的研究,以及沙门菌药物靶点的筛选奠定理论和实验基础.