地衣芽孢杆菌JF-UN122碱性蛋白酶的分离纯化与性质

摘要

地衣芽孢杆菌JF-UN122的发酵液,以硫酸铵分段盐析得粗酶,再经DEAE-Sephadex A-50吸附色素、CM-Sephadex C-50离子交换及Sephadex G-75柱层析等步骤获得电泳纯的碱性蛋白酶.SDS-PAGE测得其分子量为31.6KDa.以酪蛋白为底物时,酶的Km为5.26μg/mL,Vm为20.8μg/min.酶的最适pH为9.0, 最适温度为55℃, pH 5～11,55℃以下酶较稳定,对1mol/LH2O2具有一定的耐氧化性.PMSF对酶抑制,二硫苏糖醇(DTT)有保护作用,钙离子、EDTA、SDS、尿素等对酶无明显影响.