牛坏死杆菌43K OMP的截短表达及多克隆抗体的制备

摘要

为制备牛坏死杆菌截短43K OMP多克隆抗体,以A25菌株基因组DNA为模板,特异性扩增43K OMP基因的4个相互重叠的截短片段,构建原核表达载体,利用大肠杆菌原核表达系统对截短基因进行表达并纯化蛋白,同时免疫家兔制备多克隆抗体。结果表明:43K OMP基因截短片段经IPTG诱导成功表达,蛋白大小分别为32 kDa、30 kDa、28 kDa和30 kDa,运用蛋白制备的多克隆抗体43K OMP-1、43K OMP-2、43K OMP-3和43K OMP-4的效价分别为1∶25600、1∶51200、1∶25600和1∶51200,且制备的抗体能识别天然43K OMP。