CFSE标记结合流式细胞术检测肝星状细胞抑制CD4+/CD8+T淋巴细胞增殖的研究

摘要

目的 研究羟基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺脂(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)标记结合流式细胞术在检测体外共培养体系中T淋巴细胞亚群增殖中的应用,并利用此方法研究小鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)对T淋巴细胞亚群增殖的影响.方法 采用磁珠分选雄性C57/B6小鼠脾脏T淋巴细胞,经CFSE标记后与脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激或不刺激的C57/B6来源的小鼠肝星状细胞系JS1共培养3d,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群的增殖,flowjo软件分析增殖动力模型.结果 JS1可以抑制CD4+和CD8+T淋巴细胞增殖的能力,并且当JS1/T细胞比值增加时,抑制作用更强.LPS的刺激不影响JS1对CD4+和CD8+T细胞增殖的抑制作用.结论 肝星状细胞JS1具有免疫抑制能力,CFSE标记结合流式细胞术是一种可靠的分析淋巴细胞增殖的工具,可以有效检测出共培养体系中细胞亚群的增殖情况,在研究体外淋巴细胞功能中具有重要的应用价值.