微载体上依赖于整全蛋白α2亚基的细胞与细胞外基质的粘附

摘要

Vero细胞是肾上皮细胞，合成并分泌层粘连蛋白和IV型胶原，从而在细胞外形成对细胞生长、迁移等有重要影响的细胞外其质膜。已知影响细胞与细胞外基质相互作用的蛋白质分子是整合蛋白。微载体所提供的三维立体培养条件与细胞在体内的生长、迁移条件相似，为在体外研究体内类似过程提供了很好的模型。通过蛋白质印迹法可以检测到：正常培养条件下，在微载体上培养48小时，Vero细胞表达整合蛋白α2亚基（Fig.la)；如果同时加入层粘蛋白，α亚基的表达量显著提高（Fig.1b)。正常培养条件下，培养10天，Vero细胞在微载体上形成密集的多层生长，α2亚基表达量明显高于培养初期（Fig.1c)。间接免疫荧光标记（Fig.2)和免疫电镜观察（Fig.3）证实：在层粘连蛋白作用下，α2亚基大量表达，并定位于细胞“附着班”位置的细胞膜上。此时,如果再用抗层粘蛋白抗体处理，可观察到原“附着斑”消失，α2亚基在细胞内呈散布状（Fig.4)。整合蛋白α2亚基的表达和与层粘连蛋白的“附着斑”提供了Vero细胞在微载体上附着和迁移的基础。可能，不同的细胞外基质可以通过不同的整合蛋白来调节细胞活动。