人诱导性多能干细胞分化的血管平滑肌细胞体外培养圆环形工程化组织的实验研究

摘要

目的通过体外培养圆环形工程化组织,建立一种评价人诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)来源的种子细胞应用于组织工程培养的实验方法。方法采用拟胚体法诱导人iPSC分化为血管平滑肌细胞,经免疫荧光染色确认细胞类型,把种子细胞加入琼脂基质培养得到圆环形工程化组织,行组织切片染色评价种子细胞的增殖和分泌功能。结果用拟胚体法诱导人iPSC可获得大量表达血管平滑肌细胞特异标志物的种子细胞。在体外把该细胞加入琼脂基质中培养获得圆环形工程化组织,组织的形态规整,具有一定的力学强度,能自我维持组织的三维形态;内部含有以胶原蛋白为主的细胞外基质,基质间细胞排列紧密,持续表达成熟的血管平滑肌细胞标志物。结论人iPSC分化的血管平滑肌细胞在体外被成功培养出结构完整的圆环形工程化组织,对组织的形态、结构及细胞外基质分析的结果显示,其可作为人iPSC来源的种子细胞应用于组织工程培养的评价指标。