鼠伤寒沙门菌tolA缺失株的构建及生物学功能研究

摘要

为了研究tolA基因在鼠伤寒沙门菌外膜完整性及外膜囊泡(OMVs)形成中的作用,通过自杀载体介导的同源重组技术,构建鼠伤寒沙门菌χ3761的tolA基因缺失株ΔtolA。通过比较鼠伤寒沙门菌野生株χ3761与缺失株ΔtolA的生物学特性,发现敲除tolA基因对χ3761的生长特性没有显著影响。革兰染色镜检发现,χ3761形态正常,为革兰阴性、两端钝圆的短杆菌,而ΔtolA形态发生明显改变,多呈球形或短链状,透射电镜观察发现ΔtolA菌体周围有许多OMVs分泌,暗示tolA基因影响OMVs的形成。另外,tolA基因缺失后,χ3761的运动能力和存活能力均显著下降;密度梯度离心后提取OMVs检测发现缺失株OMVs的产量显著增加且鞭毛明显减少。本研究为揭示鼠伤寒沙门菌的致病机制及OMVs的疫苗开发提供理论参考。