鼠伤寒沙门氏菌SL1344株cAMP受体蛋白基因缺失株的构建及其生物学特性研究

摘要

通过自杀性质粒介导的细菌同源重组技术，构建鼠伤寒沙门氏菌SL1344株的crp基因缺失疫苗候选菌株，并对其生物学特性进行初步研究。rn 首先构建含缺失321 bp crp基因的重组自杀性质粒pRE Acrp，然后利用重组自杀性质粒介导的等位基因交换技术，两步法筛选SL1344的Acrp缺失株，用PCR鉴定结果表明该缺失株构建成功。生物学特性研究发现，缺失株△crpSL1344保留了亲本菌株SL1344的血清型1，4，5，12：i：1，2，且能够稳定遗传缺失321 bp的crp基因;但是，与亲本株SL1344相比，其生化特性发生明显改变，生长速度明显减慢。缺失株△crpSL1344口服感染1日龄雏鸡的LD50为7.40x 109 CFU，毒力较亲本株SL1344降低32 456倍。以上研究结果表明，SL1344株crp基因缺失株构建成功，且遗传稳定，毒力明显降低，为进一步将其开发为鼠伤寒沙门氏菌弱毒疫苗候选菌株奠定基础。