调心方对β淀粉样蛋白所致原代培养海马神经元细胞毒模型的影响

摘要

目的 :建立β淀粉样蛋白 (Aβ)所致的神经细胞毒模型 ,探讨调心方的药效及作用机理。 方法 :原代培养大鼠海马神经元 ,用 2 5 μmol/L聚集状态的Aβ1 4 2建立神经细胞毒模型。采用乳酸脱氢酶(LDH)释放量来检测神经元存活率 ,通过透射电镜、流式细胞仪检测判断神经元凋亡 ,应用免疫细胞化学法研究凋亡相关基因的表达蛋白 (Bcl 2、Bax、c Jun)。结果 :神经元经Aβ1 4 2处理后 ,LDH释放增加 ;电镜显示细胞体积缩小、染色质固缩、或浓聚成块状位于核周边、滑面内质网扩张 ;流式细胞仪检测可见亚二倍体峰 ;Bcl 2减少 ,而Bax与c Jun增加。调心方使LDH释放减少 ,电镜下具有凋亡形态特征的细胞减少 ,流式细胞仪检测显示凋亡率下降 ,Bcl 2增加 ,Bax减少 ,而c Jun变化不明显。四氢氨基吖啶 (THA)组神经元存活率增加 ,但其他指标的变化不明显。结论 :调心方对Aβ1 4 2神经细胞毒有保护作用 ,可提高细胞存活率 ,抑制凋亡 ,其抑制凋亡作用的机制可能是通过提高bcl 2、降低bax基因的蛋白表达而实现。THA对神经元存活率有提高作用 ,但抑制神经元凋亡的作用似不明显。调心方对抑制Aβ所致神经元凋亡明显优于THA。