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人IL-12双亚基共表达载体的构建及其表达

         

摘要

目的构建人IL-12的高效表达载体。方法采用pCDNA3.1从已克隆的p40cDNA基因与国外提供的p35cDNA基因上获得相应的编码基因,分别构建表达载体进行转染。此后,又利用pLXPXSN构建IL-12双亚基共表达的逆转录病毒载体转导人肝癌细胞株,并经G418筛选。结果有功能活性的IL-12的产生需要p35和p40基因的等量共转染。为此,人IL-12双亚基共表达载体在转染肝癌细胞株并经选择后,上清液中查到了较共转染更高的具有刺激淋巴母细胞增殖活性的IL-12。结论这种人IL-12双亚基共表达载体是进行IL-12基因转染的有效表达载体。

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