一种新型单纯疱疹病毒II型DNA疫苗的构建及其初步研究

摘要

目的:构建新型的含单纯疱疹病毒II型糖蛋白D基因(gD)的卡那霉素抗性真核表达质粒pgD,并探讨其作为DNA疫苗的可能性。方法:通过PCR扩增、酶切、连接及克隆筛选从质粒pET-28a(+)和质粒pcDNA3获得新型真核表达质粒载体pcDNAkan。再通过PCR从重组真核表达质粒pcDNA3-gD上扩增出HSV-2糖蛋白D全基因序列(gD),最后克隆重组获得含gD的重组质粒pgD。pgD作为DNA疫苗免疫小鼠,观察其对小鼠的免疫效果及保护作用。结果:pgD免疫小鼠后能产生特异性抗体,与对照组相比较具有显著性差异(P<0.01),在HSV-2病毒致死性攻毒实验中,pgD组存活率达75%。结论:重组质粒pgD能诱导小鼠产生特异性免疫应答,可为HSV的DNA疫苗研制提供科学依据。