斜纹夜蛾表皮蛋白基因克隆及表达谱分析

摘要

[目的]分析斜纹夜蛾不同发育阶段14个表皮蛋白(Cuticular protein,CP)基因的表达方式,为深入探究CP在斜纹夜蛾生长发育过程中的功能提供参考.[方法]利用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增斜纹夜蛾表皮蛋白基因cDNA序列,分析其核苷酸序列和相应的氨基酸序列,并使用MEGA5.2软件构建了鳞翅目系统发育树.采用逆转录PCR(Reverse transcription PCR,RT-PCR)技术检测分析表皮蛋白基因在3～6龄幼虫各组织和2日龄成虫生殖器官中的表达.[结果]克隆了14个斜纹夜蛾表皮蛋白基因(Insect cuticular protein gene,ICPG),序列分析表明斜纹夜蛾表皮蛋白具有35～36个氨基酸残基保守基序,属于几丁质结合蛋白,它们与棉铃虫的CP具有高度的序列同源性.RT-PCR结果表明,14个ICPG在3～6龄幼虫和2日龄成虫中均有表达,其相对表达量在高龄期幼虫的表皮中较高,在低龄期幼虫的脂肪体中也较高.此外,所有14个ICPG均在睾丸和卵巢中低水平表达.在蛹期,SlICPG-11和SlICPG-14相对表达量最高.[结论]克隆了14个斜纹夜蛾CP基因的cDNA.其表达表现出组织和发育阶段特异性,暗示它们在斜纹夜蛾发育中的功能不同,为控制斜纹夜蛾靶标位点的选择奠定了基础.