棉花黄萎菌落叶型菌系毒素纯化及抗血清制备

摘要

用Sephacryl S-200 HR层析柱纯化了V991菌系毒素,经叶片针刺涂抹方法确认其致萎功能后,免疫大白兔制备了抗血清.用间接ELISA方法对强、中、弱3种不同致病力共10个菌株的培养液进行了特异性检测,结果表明:抗血清具备一定生理型特异性,能够准确检出全部强致病力落叶型菌系,可作为不同生理型划分的指标之一.用毛细管电泳、SDS-PAGE和Western杂交方法检测了V991毒素的组分:在中性条件下,毒素在毛细管电泳时存在2个峰;SDS-PAGE将毒素分为8条带,其中4条主带具有强烈的致萎性;West-ern点杂交的反应强度与相应蛋白回收带的致萎功能之间明显相关.