立氏立克次体蛋白抗原基因的表达和重组蛋白抗原的免疫印迹分析

摘要

目的 表达立氏立克次体(Rickettsia rickettsii)主要抗原基因，免疫印迹初步分析重组蛋白抗原的抗原性。方法 根据立氏立克次体全基因组序列选出主要抗原相关基因，采用PCR从全基因组中扩增抗原相关基因，将扩得的基因片段插入原核表达质粒构建抗原基因重组表达质粒，将重组质粒转化大肠杆菌并诱导转化菌表达重组蛋白抗原。采用立氏立克次体感染的豚鼠血清和斑点热患者血清分别与纯化的重组蛋白抗原做免疫印迹分析。结果 经PCR扩增后获得43个目的基因片段，其中36个基因片段在大肠杆菌中高效表达重组蛋白抗原，其中5个蛋白抗原在免疫印迹中与感染豚鼠血清和斑点热患者血清反应均为阳性。结论 免疫印迹筛选出5种立氏立克次体重组蛋白抗原，结果提示它们是能够诱导机体产生特异性免疫应答的主要抗原，可作研制斑点热诊断试剂或亚单位疫苗的新候选蛋白抗原。