犬DEA1.1血型抗体间接ELISA检测方法的建立

摘要

为探求减少宠物临床中犬因血型错配发生的输血反应,本试验以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原建立能检测DEA1.1抗体的间接ELISA方法.试验以犬DEA1.1血型为主要研究对象,提取犬红细胞膜,以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原,用醛化技术包被抗原,优化间接ELISA反应条件.结果 显示,最佳固定剂为浓度0.062 5％和0.125％的戊二醛,最佳抗原包被量为4 ～8 μg/孔,最佳封闭液为5％的脱脂奶粉,最佳温度为37℃,最适反应时间为90 min.与间接抗球蛋白试验相比,优化后的间接ELISA法有更高的灵敏性,本试验建立的间接ELISA方法可以对犬DEA1.1血型抗体进行高通量检测.