牦牛源多杀性巴氏杆菌C47-8株外膜蛋白H基因互补株的构建及生物学特性研究

摘要

根据GenBanK中发表的多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,P.multocida)HN06株(登录号为NC017027)的ompH核苷酸序列设计合成一对特异性引物,将PCR扩增获得的牦牛源P.multocida C47-8的ompH基因片段连接到pMR10载体上,构建了C47-8株△ompH缺失株互补质粒pMR10-△ompH,并将该质粒电转化至C47-8△ompH缺失株中,成功获得其互补菌株.在此基础上,对C47-8亲本株、△ompH缺失株以及互补株的生物学特性进行研究.形态学观察结果表明,3株菌的生长形态无差异;生化试验结果表明,除了缺失株发酵蕈糖、硝酸盐试验呈现阳性外,3株菌的其余生化特性未发生改变;体外生长曲线表明亲本株C47-8的生长速度比缺失株和互补株的生长速度慢,说明ompH基因对C47-8的生长有显著影响.本试验为深入研究P.multocida的致病机制以及研制安全有效的基因缺失减毒活疫苗奠定了基础.