半定量RT-PCR法分析猪肝脏中铜锌超氧化物歧化酶mRNA表达水平

摘要

细胞内铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)是动物体内一种重要的抗氧化酶.本实验室构建了优化的半定量RT-PCR法,以18S rRNA为内标,研究猪肝脏组织中CuZnSOD基因mRNA表达水平.提取猪肝脏组织总RNA,经反转录后进行扩增,先寻求PCR线性扩增范围,确定RT-PCR的最佳循环数和Mg2+浓度.扩增后用VDS摄像系统扫描PCR扩增产物的电泳条带灰度.通过CuZnSOD PCR产物的灰度与18S rRNA PCR产物的灰度之比,即可计算出CuZnSOD mRNA的相对含量.