家蝇幼虫防御素基因MddⅠ在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性鉴定

摘要

根据家蝇幼虫防御素基因(MddⅠ)序列,设计合成含有Kpn Ⅰ和Xba Ⅰ酶切位点的特异性引物,PCR扩增出MddⅠ基因全长序列.克隆并测定序列后,构建真核表达质粒pGAPZαA-MddⅠ,将其在毕赤酵母(P.pastoris) GS115中分泌表达,并对表达产物进行抑菌活性分析.结果表明,Mdd Ⅰ基因在P.pastoris中成功表达,分子量约为10.3 kDa,抑菌结果显示MddⅠ基因的真核表达产物对猪源链球菌有抑制作用.该试验成功构建了表达MddⅠ基因的P.pastoris菌株,为进一步研究Mdd Ⅰ真核表达产物的生物学活性和免疫学活性奠定了基础.