超声介导脂膜微泡靶向传输绿色荧光蛋白基因的体内实验研究

摘要

目的 探讨超声(US)对裸鼠人宫颈癌(Hela)皮下移植瘤绿色荧光蛋白(EGFP)基因传输和定位的作用以及脂膜微泡(LSMB)对转染的增强作用.方法 将LSMB和质粒经裸鼠尾静脉注入,并予以超声辐照(LSMB+US),辐照条件为:2.0 W/cm2,20%占空比.2 min,以仅质粒注射(P)、质粒注射加超声辐照(US+P)、LSMB和质粒注射(LSMB+P)作为对照,行冰冻切片和组织学检查,通过荧光评分评估EGFP表达,并对表达持续时间和靶向性进行分析.结果 注射质粒和LSMB联合超声辐照可明显增加基因转染效率,LSMB+US组的裸鼠皮下移植瘤内有显著的EGFP表达,均高于P组、US+P组或LSMB+P组(P＜0.01);基因表达的最佳时间是第3天(P＜0.01);无论有否超声照射,裸鼠其他器官组织中均无明显的EGFP表达,且未观察到明显的组织损伤.结论 超声辐照联合LSMB和质粒注射的方法能显著增加裸鼠移植瘤的基因转染,而无明显的副作用,是一种高效的非病毒基因传输方法,为目前的基因治疗提供新思路.