超声介导iRGD靶向载药脂质体-微泡复合物的体外溶栓作用

摘要

目的构建iRGD靶向载尿激酶脂质体-微泡复合物（iRGD-LMC）,探讨其联合超声靶向微泡破坏技术（UTMD）的体外溶栓作用。方法薄膜-水化法制备靶向微泡,冻融法制备载尿激酶（uPA）脂质体,两者通过生物素-亲和素偶联获得iRGD-LMC。共聚焦显微镜观察其形态特征,颗粒计数仪测定其粒径和浓度,BCA试剂盒测定载药量,Vevo 2100超声成像仪对其进行体外超声成像。设置不同的超声强度及时间,比较药物释放率。制作体外血栓模型,观察iRGD-LMC联合超声的溶栓效果。结果制备的iRGD-LMC表现为普通微泡形态,浓度为（0.51±0.03）×10~9/ml,粒径为（2.62±0.12）μm,载药量为每10~8个复合物载uPA（3 878.5±97.8）μg。超声下iRGD-LMC可显影并释放药物。在体外溶栓实验中,iRGD-LMC联合超声组的溶栓效率为（87.66±1.69）%,溶栓效果最好,与阴性对照组。单纯超声组、单纯尿激酶组、单纯iRGD-LMC组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论成功构建了iRGD-LMC,并结合了脂质体高载药量、超声溶栓及微泡助溶的优点。体外实验证实,联合UTMD可促进药物释放,取得了显著的溶栓效果。