三明野生蕉β-1,3-葡聚糖酶Mugsp7基因克隆及其在低温处理下的表达分析

摘要

cqvip:以三明野生蕉组培苗为材料,通过RT-PCR技术克隆获得β-1,3-葡聚糖酶基因Mugsp7(β-1,3-glucanase)的cDNA和gDNA序列,并对该基因进行生物信息学分析和不同低温下的实时荧光定量PCR表达分析,并进一步测定8℃处理1、2、3、4和5d后三明野生蕉叶片β-1,3-葡聚糖酶活性。结果表明:MugsP7的gDNA长1132 bp,开放阅读框(ORF)长984 bp,具有一个148 bp的内含子,共编码327个氨基酸。cDNA、gDNA的登录号分别为KU363808和KU363809。生物信息学分析表明,Mugsp7属于酸性、亲水、稳定性蛋白,不具有信号肽,与小果野蕉、大叶藻、玉米、大麦、水稻等位于同一分支,与小果野蕉亲缘关系较近分为一类。实时荧光定量PCR表明,不同低温处理和8℃低温不同时间处理下,Mugsp7呈现不同表达模式,且三明野生蕉叶片β-1,3-葡聚糖酶活性的测定分析也进一步表明,Mugsp7能进一步响应低温胁迫。因此,推测在三明野生蕉抗寒响应中发挥重要作用。