1株广东鸽源Ⅰ型副黏病毒的分离鉴定

摘要

为鉴定并分离出疑似鸽副黏病毒病的病原,临床采集广东省清远市某鸽厂疑似鸽新城疫的发病鸽脑、肝、脾、肺组织,处理后接种到10日龄SPF鸡胚尿囊腔,收集尿囊液,测定血凝价、细胞半数感染量(TCID50).设计F、HN基因引物,扩增分离株F、HN基因,使用Lasergene软件对F基因序列分析.结果显示,此分离株F蛋白裂解位点处的氨基酸排列符合强毒株裂解位点特征,与Qinghai/1344/2017、China/SDLC/2011、Sichuan/2045/2014株同源性分别为99.2％、98.8％、98.5％,属于基因Ⅵ型.传到6代后,分离株血凝价稳定在7～8log2.1～4代TCID50分别为:10-6/0.1ml、10-6.5/0.1ml、10-7.5/0.1ml、10-7.8/0.1ml,5-10代TCID50分别为:10-8.4/0.1ml、10-8.2/0.1ml、10-8.59/0.1ml、10-8.23/0.1ml、10-8.49/0.1ml、10-8.4/0.1ml,表明分离的毒株TCID50较高且5代以后的TCID50分布在10-8.2∽10-8.59/0.1ml.本研究旨在为今后鸽新城疫分子流行病学及鸡胚成纤维细胞测定病毒感染量方面研究提供理论依据.