组织工程化人正常食管上皮细胞的培养

摘要

目的：在体外分离、培养食管上皮细胞，是研究组织工程食管的最基本环节。实验拟寻找适用于组织工程食管研究的食管上皮细胞培养方法。方法：实验于2007—05／11在兰州大学医学实验中心完成。①实验材料：取食管癌患者手术切除的正常食管长2．0～3．0cm，患者对试验知情同意。②实验方法：获取可用于组织工程的食管上皮细胞，常规传代培养。⑨实验评估：免疫组织化学染色、倒置相差显微镜下观察培养20min，1～4d细胞在含血清培养基DMEM＋F12（1：1）中的生长情况；四甲基偶氮唑盐法测绘1～6d细胞的生长曲线。结果：①免疫组织化学方法检测结果显示，90％以上细胞呈阳性，证明培养的细胞为食管上皮细胞。②正常细胞较大，呈球形悬浮于培养基中；约20min后开始贴壁，1d后大部分细胞贴壁生长并呈不规则圆形或多边形；2d后细胞开始成簇生长；三四天细胞达生长高峰，胞浆丰富，核大而圆。⑧培养第3天细胞生长达高峰，其吸光度值与第1，2，5，6天比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：应用含血清培养基DMEM＋F12（1：1）培养食管上皮细胞，方法简便，适合推广应用。