体外诱导人脐带间充质干细胞向肝样细胞的分化

摘要

背景:多项研究表明间充质干细胞具有向肝细胞分化的潜能,这将为肝细胞移植、生物人工肝、肝组织工程提供大量种子细胞,也有望在急性肝衰竭、终末期肝病和遗传代谢性肝脏疾病治疗方面带来较大突破。目的:拟在体外诱导人脐带间充质干细胞向肝样细胞分化,观察其形态及功能变化。方法:取体外培养第3代处于对数生长期的人脐带间充质干细胞,以1×109L-1的细胞浓度种植在培养瓶中,加入含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基,设立3组:实验1组加入20μg/L肝细胞生长因子+10μg/L碱性成纤维细胞生长因子,实验2组在其基础上另加入20μg/L制瘤素,空白对照组不加入任何生长因子。根据细胞生长情况,每周换液两三次。分别于培养7,14,18d在倒置显微镜下观察细胞形态,采用免疫细胞化学检测甲胎蛋白、白蛋白及细胞角蛋白18的表达,运用PAS法检测糖原的表达。结果与结论:人脐带间充质干细胞可在含20μg/L肝细胞生长因子、10μg/L碱性成纤维细胞生长因子、20μg/L制瘤素、体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养体系中诱导分化为具有肝细胞表型和功能的细胞,且肝细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、制瘤素联合应用的诱导效果优于单纯应用前两者。