联合诱导兔脂肪源性基质细胞的成肌潜能

摘要

背景：成肌种子细胞是构建工程化成肌复合物的基础，如何优化其扩增是过渡到临床应用的核心。目的：分析将MyoD、转化生长因子B1及5-氮杂胞苷不同模式下联合诱导兔脂肪源性基质细胞体外成肌潜能的变化。方法：取兔腹部脂肪，采用胶原酶消化法分离获取脂肪源性基质细胞，分别以不同方式进行成肌细胞诱导：5-氮杂胞苷诱导组；MyoD＋转化生长因子B1诱导：5-氮杂胞苷＋MyoD＋转化生长因子β1联合诱导组；并设空白对照。于诱导第1，4，8，12，16，20，24，28天观察细胞形态学特点，行MTT比色法、流式细胞仪和免疫组织化学检测鉴定细胞，检测Ⅲ型胶原含量。结果与结论：联合诱导组与其他组相比，细胞生长迅速，16d增殖达高峰，20d肌管数量增多，体积增大，排列规则，呈结蛋白强阳性表达，细胞周期显示联合诱导组脂肪源性基质细胞的DNA复制期细胞比例增加，间隙期细胞减少，Ⅲ型胶原含量明显增高，差异有显著性意义。结果提示，多因子联合5-氮杂胞苷模式能有效促进脂肪源性基质细胞向成肌细胞定向分化，细胞增殖显著，是成肌细胞体外诱导的理想方法。