小鼠心肌祖细胞的永生化及筛选

摘要

背景：移植外源干细胞治疗功能性心肌细胞死亡或凋亡,易导致移植并发症,因此心脏本身存在的心肌祖细胞成为理想的种子细胞。目的：建立稳定来源于小鼠心脏的心肌祖细胞株,为研究影响心肌祖细胞在成体心肌细胞受损时的增殖分化因素提供理想的细胞模型。方法：①分离培养胚胎15.5 d的小鼠心肌细胞。②感染反转录病毒SSR69使心肌细胞永生化,通过抗生素筛选和无限稀释法获得永生化的单克隆心肌祖细胞。③筛选出具有心肌祖细胞特性的单克隆细胞株。结果与结论：①成功分离培养出心肌细胞,部分细胞可见明显搏动。②感染病毒后,通过潮霉素筛选成功选出76个单克隆,并将其进行命名为CP15-#。③对第1-20号克隆,根据心肌细胞标志基因筛选出具有心肌祖细胞特性的克隆。表明通过可逆SV40 T抗原介导的途径成功建立永生化心肌祖细胞。