细菌影载体负载防龋DNA疫苗免疫小鼠的效果研究

摘要

目的研制鼠伤寒沙门菌细菌影,负载防龋DNA疫苗,探寻增强防龋DNA疫苗黏膜免疫效能的方法。方法将pREP4质粒和噬菌体PhiX基因E表达质粒同时转入鼠伤寒沙门菌减毒株J357中,加入异丙基硫代半乳糖苷（isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG）诱导,收集洗涤,负载防龋DNA疫苗,分4组经鼻免疫小鼠,分别为:细菌影+pGJGLU/VAX组,细菌影负载5μg防龋DNA疫苗pGJGLU/VAX;细菌影+pVAX1组,细菌影负载5μg空载体pVAX1;pGJGLU/VAX组,布比卡因包裹5μg pGJGLU/VAX;pVAX1组,布比卡因包裹5μg pVAX1。酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法检测唾液抗体产生结果。结果 ELISA结果显示经鼻黏膜免疫鼠伤寒沙门菌J357细菌影负载的防龋DNA疫苗pGJGLU/VAX（细菌影+pGJGLU/VAX组）后,诱导了显著的唾液特异性抗葡聚糖结合区的IgA抗体,x±sx为（0.367±0.086）A/μg,与细菌影+pVAX1组[（0.122±0.077）A/μg]、pGJGLU/VAX组[（0.068±0.068）A/μg]和pVAX1组[（0.089±0.089）A/μg]相比,差异均有统计学意义（P值分别为0.028、0.012和0.030）。结论成功制备了鼠伤寒沙门菌细菌影,负载防龋DNA疫苗后经鼻黏膜途径免疫小鼠能有效提高免疫效能。