微矩阵基因芯片筛选抗抑郁剂地昔帕明相关基因的研究

摘要

目的研究抗抑郁剂相关基因,探讨其可能作用机制.方法与结果以高浓度皮质酮(Cort)10 μmol*L-1或Cort与三环类经典抗抑郁剂地昔帕明(DIM)5 μmol*L-1共同处理PC12细胞3 d分别作为对照组和实验组,按Trizol一步法提取细胞总RNA并纯化mRNA,将等量的对照组与实验组mRNA以逆转录法分别标记荧光素cy3和cy5,合成cDNA探针并等量混合,与小鼠2048点微矩阵基因芯片杂交,扫描荧光信号图像并分析比较二组差异表达基因,发现DIM与Cort共孵PC12细胞3 d可以诱导259个基因表达水平发生改变.其中163个基因表达降低,如葡萄糖调节蛋白78 ku、葡萄糖激酶(GA)、细胞骨架蛋白、转化性生长因子β受体结合蛋白、细胞色素C氧化酶、锂盐敏感性内消旋肌醇一磷酸酯酶等;有96个基因表达水平升高,如神经元生长分化因子-9(GDF-9)、锌指蛋白216、细胞色素P450、睾丸特异基因-1等.随机选取二个差异表达基因GA和GDF-9,以细胞原位杂交方法验证,取得与基因芯片评价一致的结果.结论抗抑郁剂DIM作用可能与能量代谢、细胞骨架、营养因子、酶等多层次、多水平的基因表达改变有关.本研究利用基因芯片技术对抗抑郁剂相关基因进行了初步探索,为深入研究抗抑郁剂作用机制和药物筛选芯片的研发提供了线索与依据.