司坦唑醇激活大鼠生长板软骨细胞雌激素受体α、胰岛素样生长因子1受体和细胞外信号调节激酶1/2的交联对话

摘要

目的探讨司坦唑醇（ST）对离体培养的促性腺激素释放激素拟似物（GnRHa）处理后青春期大鼠生长板软骨细胞的作用及其分子层面机制。方法设计并处理后获得胫骨原代软骨细胞, 采用免疫组织化学法, 检测ST处理后软骨细胞核增殖细胞核抗原（PCNA）的表达;采用Western Blot法, 分析ST作用后软骨细胞雌激素受体α（ERα）、雄激素受体（AR）、胰岛素样生长因子1受体（IGF-1R）及细胞外信号调节激酶（ERK1/2）表达的改变。结果 （1）ST处理后, PCNA呈阳性的细胞明显增加, 与0 d组（0.05%）比较, 1 d、2 d、3 d组的阳性率差值显著增加（分别为11.0%, 24.0%, 14.0%）。（2）延长ST作用时间和增加ST浓度, AR均未能被激活。ST作用后磷酸化（p）-ERα、p-IGF-1R、p-ERK1/2表达上调, 并存在时间和浓度依赖;ERα或丝裂原激活蛋白激酶激酶（MAPK）被阻断后, ST所致的p-ERα表达较未阻断时减弱（1.18±0.07、2.35±0.05;1.45±0.17、2.77±0.39, P均＆0.05）;ERα或IGF-1R阻断后的p-IGF-1R较ST组显著减弱（4.42±0.42、8.00±0.30;0.77±0.17、11.37±0.97, P均＆0.05）;MAPKK或IGF-1R被阻断后p-ERK1/2较未阻断组显著减弱（0.61±0.14、9.26±0.92;4.27±0.76、8.59±0.52, P均＆0.05）。结论 ST可以促进软骨细胞增殖, 其作用主要经ERα介导, 包括了经典的与ERα以配体结合方式和以非配体激活的MAPK途径, 并同时激活IGF-1R, 实现其促长骨生长板软骨细胞生长和成熟的生物效应。