香烟对小鼠C2C12成肌细胞分化的影响

摘要

目的:探讨香烟烟雾浓缩物(CSC)对小鼠骨骼肌C2C12成肌细胞分化的影响. 方法:小鼠骨骼肌成肌细胞C2C12传代后分为对照组、0.3%CSC孵育组、3%CSC孵育组,细胞在含有马血清的DMEM培养基第6-7 d可分化成熟的肌细胞.细胞分别在第1 d、第3 d在相应组中加入CSC,并在第6 d进行各项检测:通过光学显微镜来观察细胞形态的变化,通过酶联免疫检测仪检测细胞内谷胱甘肽(GSH)和肌酸磷酸激酶(CK)的浓度,应用Western印迹检测肌球蛋白重链(MYHC)的蛋白表达,通过凝胶迁移率阻滞实验来检测转录因子核因子-κB(NF-κB)的活性.结果:在细胞形态上0.3%和3%的CSC能够抑制骨骼肌肌管的形成;0.3%和3%CSC处理组细胞中GSH和CK的含量较对照组明显减少,在0.3%和3%的CSC孵育组中MYHC蛋白表达明显减少,0.3%和3%的CSC孵育组中NF-κB的活性较对照组明显增强.结论:CSC一方面加重细胞氧化应激,使细胞的GSH减少,同时导致细胞的炎症反应增加,导致NF-κB的活性增加.二者相互作用引起骨骼肌细胞的分化明显减弱.