慢性高眼压状态下小鼠水通道蛋白4基因对视网膜胶质细胞活化的影响

摘要

目的研究慢性高眼压状态下小鼠水通道蛋白4（AQP4）基因是否通过影响胶质细胞的活化造成青光眼视网膜的损伤,并探讨其可能机制。方法实验研究。采用小鼠巩膜外静脉烧烙法建立小鼠高眼压模型。应用回弹式眼压计测量小鼠眼压。右眼为慢性高眼压眼,左眼为对照眼。选择造模成功的慢性高眼压雄性AQP4基因敲除（AQP4-/-）小鼠及其背景雄性野生型（WT）小鼠各40只,根据慢性高眼压模型建立的时间（手术结束时开始计算）,将两种小鼠分别分为5组（24 h、3 d、1、2、4周）,每组8只。石蜡切片行AQP4-/-小鼠及WT小鼠胶质细胞中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和WT小鼠AQP4的免疫组织化学染色,荧光显微镜下采集图像。小鼠眼压的组间比较采用￡检验。结果小鼠巩膜外静脉烧烙术后24 h、3 d、1、2、4周,AQP4-/-小鼠和WT小鼠慢性高眼压眼眼压（11.30±1.59、11.20±1.15、10.60±1.53、10.75±1.45、lO.45±1.39和11.50±2.56、11.25±1.65、10.75±1.33、10.60±1.33、10.40±1.19）与对照眼（6.60±O.94、6.35±O.99、6.55±0.94、6.45±0.99、6.50±0.94和6.60±1.05、6.50±0.89、6.40±1.09、6.30±1.13、6.50±1.05）相比,差异有统计学意义（t=6.66～18.08,P＜0.05）。免疫荧光染色结果显示,术后24 h两种小鼠慢性高眼压眼的GFAP表达量均开始增加,1周时表达水平最高,2周时开始减弱,4周时最弱,但仍高于对照眼;术后1周时WT小鼠较AQP4-/-小鼠GFAP的表达量增加更为明显;WT小鼠在眼压升高1周时AQP 4的表达量较对照眼明显增加,2、4周时仍高于对照眼;WT小鼠在眼压升高1、2、4周时AQP4表达水平与GFAP表达水平均具有一致性。结论小鼠巩膜外静脉烧烙的方法能有效升高小鼠眼压;高眼压状态下AQP4基因可能通过影响小鼠胶质细胞的活化造成青光眼视网膜损伤。