p53通路微小RNA在卵巢癌细胞和浆液性卵巢癌组织中的表达及意义

摘要

目的 探讨微小RNA（miRNA）miR-449a、miR-449b和miR-192家族是否与miR-34家族一样可作为p53通路成员,在卵巢癌中发挥作用。方法 以DNA损伤药物阿霉素处理p53野生型卵巢癌A2780细胞,采用Western blot法检测A2780细胞中p53蛋白的表达改变,采用实时定量PCR法检测激活p53后miR-449a/b、miR-34a、miR-34b、miR-34c、miR-192和miR-194的表达。在p53突变型卵巢癌SKOV3.ipl细胞中过表达miRNA,检测SKOV3.ipl细胞的细胞周期改变。采用实时定量PCR法检测miR-449a/b、miR-34a、miR-34b、miR-34c、miR-192和miR-194在正常输卵管以及不同分级分期的浆液性卵巢癌组织中的表达。结果 在阿霉素处理后24h,卵巢癌A2780细胞中p53蛋白的表达明显升高,miR-34b、miR-34c、miR-449a/b的表达约升高19～21倍,但miR-192和miR-194的表达未见明显变化。转染miR-449b和miR-34c后,SKOV3.ipl细胞出现G1期阻滞。miR-449a/b在浆液性卵巢癌组织中的表达改变与miR-34b和miR-34c基本平行,它们在高级别和晚期浆液性卵巢癌组织中的表达水平,显著低于正常输卵管组织以及低级别和早期浆液性卵巢癌组织;miR-192、miR-194和miR-34a在卵巢癌组织中的表达未发现明显的特征,在正常输卵管组织中的表达也明显低于miR-449a/b、miR-34b和miR-34c。结论 miR-449a/b与miR-34b、miR-34c作为抑癌基因,在p53通路中发挥协同作用,它们的功能缺失与浆液性卵巢癌的发生、发展密切相关。